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冷冻研磨机的研磨步骤-为什么要进行研磨?介质

作者:admin 文章来源:未知 点击数: 发表时间:2019-06-10 17:44

冷冻研磨机,能产生上下震荡、曲线形旋涡震荡。冷冻研磨机借助研磨珠(氧化锆、钢珠、玻璃珠、陶瓷珠)的往复振动、撞击、剪切, 能对样品进行快速、均匀的研磨。冷冻研磨机一次可同时处理36个样品。对于难处理的土壤、头发、骨骼、牙齿、顽固的细菌、真菌细胞壁,甚至孢子体的研磨效率非常高,且整个研磨过程用时短,并保留生物分子(DNA、RNA、蛋白质)和药物分子的完整性。样品之间不存在交叉污染。


液氮冷冻研磨必要性
在分子生物学实验中,动物的肌肉组织、结缔组织、骨组织、毛发组织等,植物的根、茎、叶、种子等均需磨碎,进而对其成分、基因与蛋白质及结构和功能进行研究。
为了使各种组织成分在研磨过程中不易被破坏或降解,又为了使组织变硬、脆性增加,从而易于磨碎,特别是有关核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)的研磨分离提取。需要先将生物材料放置到液氮中快速冷冻,终止细胞内外一切生物反应,同时生物材料细胞完全冻硬、脆化,这样研磨可以达到很好的破胞效果,将细胞磨成粉,使里边的物质释放出来。
可研磨样本
◇植物组织:根、茎、叶、花、果、种子等
◇动物组织:大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、   肌肉、骨骼等
◇木材、种子、致密的土壤和沙土等
◇真菌细菌:酵母、大肠杆菌、孢子等
◇古老干燥的样本、铁锈等
◇整个昆虫、藻类、珊瑚乳液等

液氮冷冻研磨步骤
1.  将组织样本分装到合适的离心管内。
2.  在离心管内添加适量裂解介质
3.  将离心拧紧盖子,本插入冷冻适配器中。
4.  使用专用适配器夹具,将冷冻适配器整体放置到液氮中,3-15分钟。
5.  再使用专用适配器夹具,将冷冻适配器整体放置取出,放置到Gd200plus研磨仪,并拧紧固定手柄。
6.  设置研磨速度和时间,启动Gd200plus研磨仪
7.  研磨仪停止后,取出冷冻适配器,并取出离心管。
注意事项
1.     液态氮在常压时的温度相当的低,使用液态氮时须额外注意,避免与皮肤的直接接触。
2.     将冷冻适配器放置到液氮中和从液氮中取出,需使用专用适配器夹具进行,并佩戴防冻手套
1号裂解介质
性能:主要是石榴石和氧化锆珠子,介质的锋利性、菱角和不规则的表面能够产生非常高的裂解效果,可以用来裂解、研磨和匀浆坚硬难磨的样品。
适用样品类型:动物、细菌、酵母、真菌、植物
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:带状氧化锆珠;不规则形状的石榴石
平均大小:锆珠,6.35mm左右;石榴石0.6mm左右
样品管规格:2ml、5ml、15ml、50ml
2号裂解介质
性能:主要是0.1mm硅珠,可用来裂解革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,也可以用来处理真菌和孢子。
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:0.1mm球形硅珠
平均大小:0.1mm左右
样品管规格:2ml、5ml、15ml、50ml
3号裂解介质
性能:主要是1mm左右硅珠,可用来裂解酵母、真菌、孢子,也可用于霉菌和藻类
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状: 1mm左右球形硅珠
样品管规格:2ml、5ml、15ml、50ml
4号裂解介质
性能:主要是1.2-1.6mm陶瓷珠。可以用来裂解比较软的组织,如脑、肝脏、肾脏、肺、脾等组织。也可以用来裂解植物组织,如叶、根、果实、培养的细胞和昆虫。
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状: 1.2-1.6mm球形陶瓷珠
样品管规格:2ml、5ml、15ml、50ml
5号裂解介质
性能:主要是1.4mm陶瓷珠, 0.1mm硅珠和一个4mm的玻璃珠。可用于环境样品,如土壤、泥浆、废水和粪便。
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:1.4mm球状陶瓷珠、0.1mm球状硅珠、4mm球状玻璃珠
样品管规格:2ml、5ml、15ml、50ml
6号裂解介质
性能:主要是1.6mm氧化铝颗粒和1.6mm碳化硅颗粒,可用于裂解粗糙的、坚硬的、脆的细胞膜。
适用样品类型:动植物组织、细菌、霉菌、真菌、珊瑚乳液
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:氧化铝,阿尔法氧化铝晶体;碳化硅,半面晶体
样品管规格:2ml
7号裂解介质
性能:主要是1.6mm碳化硅颗粒和2mm玻璃珠。可用于裂解粗糙的、坚硬的、脆的细胞膜,适用于高碰撞力低剪切力的样品。
适用样品类型:脆性细胞壁的植物和动物组织、酵母、真菌
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:碳化硅,半面晶体;玻璃珠,球状
样品管规格:2ml
8号裂解介质
性能:主要是2mm玻璃珠和2mm黄色氧化锆珠组成。可以有效裂解非常坚硬的组织,适合于分离完整的细胞器和超分子结构。
适用样品类型:动植物组织、木材、种子、致密的土壤和沙土、菌落、整个昆虫、古老和干燥的样本。
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:球状
样品管规格:2ml
9号裂解介质
性能:主要是2mm黄色氧化锆珠和4mm黑色陶瓷珠。可以有效裂解非常坚硬的组织,适合分离完整的细胞器和超分子结构。
适用样品类型:动植物组织、木材、种子、致密的土壤和沙土、菌落、整个昆虫、古老干燥的样本、干磨真菌孢子、铁锈。
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:球状
样品管规格:2ml
10号裂解介质
性能:主要是2mm黄色氧化锆珠和1.6mm氧化铝晶体。可有效裂解坚硬的样本。
适用样品类型:动植物组织、菌落(革兰氏阳性或阴性菌)、真菌、珊瑚乳液、干磨真菌孢子、铁锈。
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:黄色氧化锆珠,球状;氧化铝,阿尔法氧化铝晶体。
样品管规格:2ml
11号裂解介质
性能:主要是6mm氧化铝珠和氧化锆陶瓷珠。用来打碎坚硬、脆的组织。
适用样品类型:所有样本、艰难的样本、骨头、种子、孢子
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:不规则形状
样品管规格:2ml、15ml、50ml
12号裂解介质
性能:主要是3mm不锈钢珠子,用来打碎坚硬、脆的组织。
适用样品类型:所有样本、艰难组织、骨骼肌、骨头、肺、心脏、种子、孢子
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:不锈钢,球状
样品管规格:2ml、15ml、50ml
13号裂解介质
性能:主要是6mm不锈钢珠子,用来打碎坚硬、脆的组织。用于从艰难的样本中提取RNA。
适用样品类型:所有样本、艰难组织、骨骼肌、骨头、肺、心脏、种子、孢子
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:不锈钢,球状
样品管规格: 50ml
14号裂解介质
性能:主要是0.5mm钇稳定氧化锆珠,可用来裂解坚硬的细胞壁。如,革兰氏阴性细菌、真菌、组织、孢子、酵母、霉菌。
适用样品类型:所有样本、坚硬的组织、骨骼肌、骨骼、种子、孢子
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:球状
样品管规格:2ml、15ml、50ml、96孔板(1.2ml)
15号裂解介质
性能:主要是2mm钇稳定氧化锆珠,可用来裂解坚硬的细胞壁。如,坚硬的茎、根和种子、整子昆虫。
适用样品类型:动植物组织、木头、种子、非常致密的土壤和粘土、整子昆虫、蜱、古老和脱水的组织
作用:DNA、RNA、蛋白质和其它小分子提取
介质形状:球状
样品管规格:2ml、15ml、50ml、96孔板(1.2ml)

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