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冷冻组织研磨仪研磨三七提取DNA实验详细步骤
三七样品中提取DNA,中国农业大学农学院之前采用研钵手工研磨的方法,在研钵内倒入液氮,在冻干状态下快速研磨,研磨过程中样品不易研磨,整体研磨样品不充分,影响实验效果,因此选择冷冻组织研磨仪。
三七是我国重要的药用植物之一,又名田七,人参三七等,为五加科人参属植物,是我国传统名贵药物,自古就有“止血神药”的美称。距今已有400多年的应用历史,在国内外久负盛名。三七主产于云南文山。品种缺乏是三七种植存在的重要技术问题,育种标记和方法则是困扰三七育种的重要问题,这与我们对三七的遗传基础缺乏了解有关。
研究发现,三七是在9100万年前与茄科植物马铃薯和辣椒分化开来,三七与四倍体的人参属植物人参和西洋参有9383个共同的基因,976个特有的转录本.,基因组测序的完成将为三七全基因组选择育种、功能基因的发现等提供了基础,也有利于三七产业关键技术问题的解决。
一、实验材料和器具:
样品:三七
工具:组织研磨仪
耗材:钢罐,研磨珠、液氮、剪刀、镊子等
实用仪器介绍:此款全新冷冻组织研磨仪,它是一种特殊的、快速的、高效率的、多试管的一致系统。可以在较短的时间内、 低温状态下完成对各种样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁,以保留蛋白质活性。
二、实验步骤:
1、准备钢罐2个,研磨珠若干颗;
2、取三七组织剪成小块与研磨珠一同放入钢罐中,将盖子拧紧;
3、将钢罐置于装有液氮的容器内,液氮容量没过钢罐即可,冷冻若干分钟,取出时戴手套或使用镊子夹取避免液氮冻伤;
4、将适合器放入研磨仪器中固定好,然后开机并将制冷功能打开进行预冷
5、将浸泡过液氮的钢罐放置适合器内,样品尽量对称放置,以保证研磨时的受力平衡,旋紧垂直定位螺旋,将安全锁扣紧。设置参数,程序结束后即可得到破碎粉末;
5、研磨完毕后请关闭电源,将安全锁归位;
6、完成后续 DNA 提取步骤。
三、注意事项:
1、每支钢罐内的样品量一般不超过罐体体积的三分之二,样品量过多会影响研磨效果。
2、样品尽量对称放置,以保证研磨时的受力平衡。
3、样品夹取过程中戴手套及使用镊子夹取避免液氮冻伤。
四、实验过程、结果图示: