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　　冷冻组织研磨机常常在实验中出现，可用范围广，耐用程度高，这次研磨主角是-小鼠内脏组织，在这里测博用了两种方式进行实验操作，下面把详细的操作步骤记录并分享给更多实验员。

　　冷冻组织研磨机研磨提取小鼠内脏组织方法一：加裂解液直接匀浆

　　1、取适量组织装入离心管，组织尽量剪碎成小块；

　　2、在离心管中加入氧化锆珠数颗（一次性使用）；

　　3、先加入试剂（不建议加入太多，液体体积过大影响匀浆效果），盖好管盖，装入组织研磨机适配器中。

　　4、组织研磨机研磨参数设置为一定转速，研磨时间为2~5min

　　注意：不同组织研磨时间不同，脑1min，肝脏、脾脏和肾脏2min、肺脏比较难研磨需3~5min，可能更长，中间应停顿1~2次防止温度过高，研磨前最好先用液氮或放置在-80度冰箱预冷；

　　5、再加入适量试剂至总体积后按照说明书上进行后续操作即可；

　　方法二：先匀浆，再取一定量液体加裂解液进行核酸抽提，适用提取小鼠组织中的病毒的核酸

　　1、取适量组织装入离心管，组织尽量剪碎成小块，样品量较多时使用大离心管；

　　2、在离心管中加入氧化锆珠数颗，使用大离心管时，可以将氧化锆珠数量增加；

　　3、加入适量的灭菌PBS或生理盐水，总体积为离心管单管体积的1/3~1/2为好，盖好管盖，装入测博组织研磨机适配器中，安装上机（研磨前最好先用液氮或放置在-80度冰箱预冷）。

　　4、组织研磨机参数设置为一定转速，研磨时间为1~5min（不同组织研磨时间不同，脑1min，肝脏、脾脏和肾脏2min、肺脏比较难研磨需3~5min，可能更长，中间应停顿1~2次防止温度过高），若研磨不充分，可以继续研磨到充分为止；

　　5、一定温度、转速，离心数分钟；

　　6、取上清液按照试剂盒说明书进行后续提取步骤。方法1中，我们之前试过一齐加1ml的试剂，可能是体积过大，反而匀浆效果不好，所以就改成先加一部分裂解先匀浆，然后再补齐1ml体积进行。

　　使用后要记得对研磨机进行维护保养操作哦：

　　1、妥当的存储：如较长时间不使用研磨机器和研磨夹具，应将研磨夹具浸在氯乙烷里用超声波清洗，然后涂上保护油保存在专用工具箱里。

　　2、清水洗净：每次研磨完成后，或者要停止研磨一段时间，都应将机器上所有的研磨液，用水彻底清洗干净，否则，残留的研磨液和研磨水将会变干、变硬或渗到研磨机内对机器造成损坏。

　　3、替换润滑油：观察研磨底盘下面的油脂，定期更换与补充新油脂，保护研磨底盘以及研磨底盘的支撑面，不要受异物的污染、撞击，研磨机正常工作时15-20天应对研磨底盘润滑油进行更换。